農藥殘留量快速(sù)檢測(cè)-酶(méi)抑製率法(fǎ)(分光光(guāng)度(dù)法)

在(zài)一(yī)定條件下(xià)
，有(yǒu)機磷和(hé)氨基甲酸(suān)酯類(lèi)農藥對膽鹼酯(zhǐ)酶正常(cháng)功能有抑製(zhì)作(zuò)用(yòng)
，其(qí)抑(yì)製(zhì)率(shuài)與農藥的濃度呈正(zhèng)比。正(zhèng)常情(qíng)況下(xià)
，酶(méi)催(cuī)化(huà)神經(jīng)傳導代(dài)謝(xiè)產物(wù)（乙酰膽鹼(jiǎn)）水解(jiě)
，其水解產物(wù)與顯色(sè)劑(jì)反(fǎn)應(yīng)
，產生(shēng)黃色物質
，用(yòng)分(fēn)光光度計在412nm處(chǔ)測(cè)定吸(xī)光度(dù)隨(suí)時(shí)間的(dí)變(biàn)化值(zhí)
，計算(suàn)出(chū)抑(yì)製率
，通(tōng)過抑製(zhì)率(shuài)可以(yǐ)判(pàn)斷出(chū)樣品(pǐn)中(zhōng)是否(fǒu)有高劑量(liáng)有機磷或(huò)氨(ān)基甲(jiǎ)酸(suān)酯類(lèi)農藥的存在。

試劑

*pH8.0緩衝溶(róng)液(yè)分(fēn)別(bié)取11.9g無水(shuǐ)磷(lín)酸氫(qīng)二鉀與３.２g磷(lín)酸(suān)二氫鉀
，用1000mL蒸餾(liù)水溶解(jiě)。

*顯色(sè)劑分別(bié)取(qǔ)160mg二(èr)硫代(dài)*甲(jiǎ)酸（DTNB）和15.6mg碳酸(suān)氫鈉(nà)
，用(yòng)20mL緩(huǎn)衝溶(róng)液溶(róng)解
，4℃冰箱中(zhōng)保存。

*底物：取(qǔ)25.0mg硫(liú)代(dài)乙酰膽(dǎn)鹼
，加3.0mL蒸餾(liù)水(shuǐ)溶(róng)解(jiě)
，搖匀後置(zhì)4℃冰箱中保存備(bèi)用。

*乙(yǐ)酰膽鹼酯酶根據(jù)酶(méi)的(dí)活性(xìng)情(qíng)況
，用緩(huǎn)衝(chōng)溶液溶解
，3min的(dí)吸(xī)光度變(biàn)化ΔA0值(zhí)應(yīng)控製在0.3以上(shàng)。搖(yáo)匀後置(zhì)4℃冰箱(xiāng)中保(bǎo)存(cún)備用。